Методики испытаний и критерии приемлемости для биотехнологических и биологических лекарственных средств

Подробнее
Текстовая версия:

СПЕЦИФИКАЦИИ: МЕТОДИКИ ИСПЫТАНИЙ И КРИТЕРИИ ПРИЕМЛЕМОСТИ ДЛЯ БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ И БИОЛОГИЧЕСКИХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ



СПЕЦИФИКАЦИИ: МЕТОДИКИ ИСПЫТАНИЙ И КРИТЕРИИ ПРИЕМЛЕМОСТИ ДЛЯ БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ И БИОЛОГИЧЕСКИХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

1. ВВЕДЕНИЕ

1.1 Цель

Это руководство содержит общие принципы утверждения и согласования для биотехнологических и биологических лекарственных средств набора как можно более однообразных международных спецификаций, необходимых для обработки заявок на регистрацию.

1.2 Справочная информация

Спецификация определяется как перечень испытаний, ссылок на методики анализа и соответствующих критериев приемлемости (численных предельных значений, диапазонов или других критериев для описанных испытаний). В спецификации устанавливается набор критериев, которым должны соответствовать лекарственные субстанции, лекарственные препараты или материалы на различных этапах производства, чтобы можно было счесть их подходящими для применения по предусмотренным показаниям. «Соответствие спецификации» означает, что лекарственная субстанция или лекарственный препарат, которые тестируются при помощи описанных методик анализа, будут соответствовать критериям приемлемости. Спецификации — это важные стандарты качества, которые предлагаются и обосновываются производителем и утверждаются регуляторными органами как условие регистрации.

Спецификации являются частью стратегии тотального контроля, направленной на обеспечение качества и постоянства характеристик лекарственных средств. Другие составляющие этой стратегии: оценка свойств лекарственного средства при его разработке, на которой основаны многие спецификации, соблюдение требований Надлежащей производственной практики (GMP), валидированный производственный процесс, испытание исходных материалов, внутрипроизводственные испытания, тестирование стабильности и тд.

Набор спецификаций составлен с учётом необходимости подтвердить качество лекарственной субстанции и лекарственного препарата без проведения полной оценки. При этом необходимо сконцентрироваться на тех молекулярных и биологических характеристиках, которые полезны в определении безопасности и эффективности лекарственного средства.

1.3 Область применения документа

Принципы, которые приводятся и разъясняются в этом документе, имеют отношение к белкам и полипептидам, их производным, а так же лекарственным средствам, в которых они содержатся (например, к конъюгированным ЛС). Эти белки и полипептиды получают при помощи систем экспрессии, представленных рекомбинантными или нерекомбинантными клеточными культурами, могут производить высокоочищенными и охарактеризовывать с использованием адекватного набора методик анализа.

Принципы, описанные в этом документе, также могут применяться к другим типам лекарственных средств, таким как белки и полипептиды, выделенные из тканей организма и физиологических жидкостей. Для определения возможности использования изложенных принципов производителям необходимо консультироваться с соответствующими регуляторными органами.

Этот документ не распространяется на антибиотики, синтетические пептиды и полипептиды, гепарины, витамины, клеточные метаболиты, производные ДНК, аллергенные экстракты, традиционные вакцины, клетки, цельную кровь и клеточные компоненты крови. Спецификации и остальные критерии для химических веществ рассматриваются в отдельном руководстве ICH «Спецификации. Методики испытаний и критерии приемлемости для новых лекарственных субстанций и препаратов. Химические субстанции».

В этом документе не описано специальных методик испытаний или специальных критериев приемлемости, также он не охватывает регулирования материалов клинических и/или доклинических исследований.

2. ПРИНЦИПЫ, КОТОРЫЕ СЛЕДУЕТ УЧИТЫВАТЬ ПРИ СОСТАВЛЕНИИ СПЕЦИФИКАЦИЙ

2.1 Изучение характеристик

Чтобы можно было установить соответствующие спецификации, необходимо изучить характеристики биотехнологических или биологических лекарственных средств с использованием подходящих техник анализа (это включает определение физико-химических свойств, биологической активности, иммунохимических свойств, чистоты и содержания примесей). Для установления и утверждения критериев приемлемости необходимо использовать данные, полученные для партий, используемых в доклинических и/или клинических исследованиях, и партий, используемых, чтобы подтвердить постоянство характеристик производственного процесса, а также данные из исследований стабильности и соответствующие данные о разработке.

Полное изучение характеристик проводится на стадии разработки и, при необходимости, после значимого изменения процесса производства. При подаче заявки лекарственное средство должно сравниваться с соответствующим стандартным образцом, если он доступен. Если это допустимо и адекватно для оценки препарата, следует проводить сравнение с природным аналогом. Также желательно, чтобы на момент подачи заявки у производителя были установленные и должным образом охарактеризованные собственные материалы сравнения, которые будут использованы для исследования биологических и физико-химических свойств производственных партий лекарственного средства. В соответствующих случаях следует рассматривать возможность применения постоянно появляющихся новых и модифицированных старых технологий анализа.

2.1.1 Физико-химические свойства

Программа исследования физико-химических свойств, как правило, включает определение состава, физических характеристик и первичной структуры желаемого лекарственного средства. В ряде случаев можно получить информацию о структуре высшего порядка желаемого лекарственного средства, по точности воспроизведения которой можно судить о биологической активности, при помощи физико-химических методик.

Для белков, которые образуются в живых организмах в процессе биосинтеза, характерна некоторая степень структурной неоднородности; поэтому, желаемое лекарственное средство может быть смесью соединений, прошедших посттрансляционную модификацию (например, гликоформ). Эти формы могут быть активными, а их наличие может не оказывать отрицательного действия на эффективность и безопасность лекарственного средства (раздел 2.1.4). Производитель должен определить характер неоднородности желаемого лекарственного средства и показать, что характеристики совпадают с характеристиками партий, которые были использованы в доклинических и клинических исследованиях. Если в характере неоднородности будет выявлена определенная постоянно повторяющаяся закономерность, в оценке активности, эффективности и безопасности (включая иммуногенность) отдельных форм может не быть необходимости.

Неоднородность может также возникать при производстве и/или хранении лекарственных субстанций или препаратов. Поскольку неоднородность этих лекарственных средств определяет их качество, необходимо подробно описать степень и профиль неоднородности, чтобы подтвердить сохранение характеристик препарата от партии к партии. Когда свойства вариантов желаемого лекарственного средства сравнимы с желаемым лекарственным средством по активности, эффективности и безопасности, они считаются родственными субстанциями. Если изменения процессов производства и продукты разложения приводят к неоднородности с закономерностью, отличной от той, что отмечалась в материале доклинических и клинических исследований, необходима оценка значимости этих изменений.

Методы анализа для изучения физико-химических свойств приводятся в приложении 6.1. В соответствующих случаях следует рассматривать возможность применения постоянно появляющихся новых и модифицированных старых технологий анализа.

Необходимо выбрать и обосновать соответствующий набор таких методов для испытаний при выпуске партии (раздел 4).

2.1.2 Биологическая активность

Оценка биологических свойств представляет собой равноценно важный шаг в установлении полного профиля характеристик препарата. Одно из важных свойств лекарственного средства – его биологическая активность. Оно описывает специфическую способность или возможность достигать определённого биологического эффекта.

Производитель должен предоставить биологический способ количественного определения биологической активности. Примеры методик, которые используются для оценки биологической активности, включают:

Количественное определение биологической активности с использованием животных, в ходе которого оценивается биологический ответ организма на препарат;

Количественное определение биологической активности в клеточных культурах, в ходе которого оценивается биохимический и физиологический ответ на клеточном уровне;

Биохимические способы количественного определения, при которых измеряется биологическая активность, например, скорость катализируемых ферментами реакций или биологические ответы, вызванные иммунологическими взаимодействиями.

Также могут использоваться другие методики, например, оценка связывания лигандов с рецепторами.

Специфическая активность (выражается в единицах) является количественным показателем биологической активности, основанным на признаке лекарственного средства, связанном с соответствующими биологическими свойствами, в то время как, количество (выраженное в единицах массы) является физико-химическим показателем содержания белка. Имитировать биологическую активность в клинических условиях необходимо не всегда. Следует установить корреляцию между ожидаемым клиническим ответом и активностью, вычисленной с помощью биологического количественного определения, в фармакодинамических или клинических исследованиях.

Результаты оценки биологической активности следует выражать в единицах активности, калиброванных относительно международных или государственных стандартных образцов. Если таких стандартных образцов нет, следует создать собственный материал сравнения с изученными характеристиками и оценивать результаты количественного определения производственных партий в единицах активности собственных образцов.

Часто данные о физико-химических свойствах сложных молекул могут быть многочисленными, но непригодными для подтверждения третичной и четвертичной структур, однако эти структуры можно определить по биологической активности. В таких случаях может быть допустимо проводить биологическое количественное определение с более широким доверительным интервалом в сочетании со специальными количественными оценками. Важно, что биологическое количественное определение биологической активности препарата можно заменить физико-химическими испытаниями, только когда:

при помощи физико-химических методов может быть получено достаточно информации о физико-химических особенностях препарата, включая данные о структурах высшего порядка, и доказана значимая корреляция этих структур с биологической активностью препарата;

производство хорошо отработано.

Если для количественной оценки биологической активности используются только физико-химические испытания (при наличии соответствующей корреляции), результаты должны приводиться в виде массы.

Производитель должен обосновать выбор соответствующего количественного анализа (биологического или физико-химического) для испытаний при выпуске партий (раздел 4).

2.1.3 Иммунохимические свойства

Если целевое лекарственное средство это антитело, необходимо полностью охарактеризовать его иммунохимические свойства. По мере целесообразности, следует провести исследование связывания антитела с очищенными антигенами и с определенными участками антигенов, чтобы выявить сродство, авидитет и иммунореактивность (в том числе, перекрестную реактивность). Кроме того, необходимо биохимически определить целевую молекулу, несущую актуальный эпитоп, и сам эпитоп, если это возможно.

Для некоторых лекарственных субстанций или препаратов может быть необходимо исследовать молекулу белка с помощью иммунохимических методик (например, ИФА, вестерн-блоттинга), использующих антитела, которые узнают различные эпитопы белковых молекул. Иммунохимические свойства белка могут служить для установления его подлинности, однородности или чистоты, или определения его количества.

Если иммунохимические свойства – один из критериев в испытаниях для выпуска партии, вся соответствующая информация, касающаяся антитела, должна стать доступной.

2.1.4 Чистота, примеси и контаминанты

Определение абсолютной и относительной чистоты представляет собой значительную аналитическую проблему, а результат определения в значительной степени зависит от метода. Исторически относительная чистота биологического лекарственного средства выражалась в значениях удельной активности (единицы биологической активности на мг лекарственного средства), что также значительно зависит от метода анализа. Следовательно, чистота лекарственной субстанции и лекарственного препарата оценивается комбинацией аналитических методик.

В связи с уникальностью процесса биосинтетического производства и молекулярных характеристик биотехнологических и биологических лекарственных средств, лекарственная субстанция может включать несколько молекулярных структур или вариантов. Когда такие молекулярные структуры выделяют из ожидаемой посттрансляционной модификации, они являются частью целевого лекарственного средства. Когда варианты целевого лекарственного средства образуются во время производственного процесса и/или хранения и имеют свойства, сравнимые с целевым лекарственным средством, они считаются родственными субстанциями, а не контаминантами (раздел 2.1.1).

По возможности для родственных лекарственному средству субстанций должны быть установлены индивидуальные или коллективные критерии приемлемости.

Необходимо выбрать и обосновать соответствующую подгруппу методов для испытаний на чистоту при выпуске партии (раздел 4).

В дополнение к оценке чистоты лекарственной субстанции и лекарственного препарата, которые могут состоять из целевого лекарственного средства и множества родственных субстанций, производитель также должен оценить возможные примеси. Примеси могут быть следствием процесса производства или связаны с лекарственным средством. Они могут иметь известную структуру, быть частично охарактеризованными или неизвестными. Если удастся получить примеси в достаточных количествах, следует охарактеризовать эти материалы в максимально возможной степени и, если это возможно, оценить их биологическую активность.

К технологическим примесям относятся те, что возникают как следствие процесса производства, т.е. их источник – это субстраты клеток (например, белки или ДНК клетки-хозяина), клеточные культуры (например, индукторы, антибиотики, компоненты сред) или последующие этапы обработки (см. приложение, раздел 6.2.1). Родственные лекарственному средству примеси (например, вещества-предшественники, определенные продукты разложения) являются молекулярными вариантами, которые возникают во время производства и/или хранения и не обладают сравнимыми с целевым лекарственным средством свойствами с точки зрения активности, эффективности и безопасности.

Более того, критерии приемлемости для примесей должны быть основаны на данных, полученных для партий, которые использовались в доклинических и клинических исследованиях, и партий, которыми подтверждалось постоянство результатов производства.

Для примесей (родственных и технологических) необходимо установить индивидуальные и/или коллективные критерии приемлемости. В определенных условиях для некоторых примесей может не быть необходимости в критериях приемлемости (раздел 2.3).

Примеры методик анализа, которые могут использоваться для определения наличия примесей, перечислены в приложении 6.2. В соответствующих случаях должны использоваться постоянно совершенствующиеся новые аналитические технологии и модификации существующих технологий.

Необходимо выбрать и обосновать соответствующую подгруппу таких методов для испытаний при выпуске партий (раздел 4).

К контаминантам в лекарственных средствах относятся все занесенные извне материалы, не предназначенные в качестве части производственного процесса, такие как химические и биохимические материалы (например, микробные протеазы) и/или штаммы микробов. Следует тщательно избегать контаминантов и/или соответствующим образом контролировать их с помощью внутрипроизводственных критериев приемлемости или пределов, при выходе за которые необходимо вмешательство в производственный процесс, в спецификациях для лекарственных субстанций и препаратов (раздел 2.3). В особых случаях контаминации вирусами или микоплазмами концепция пределов вмешательства неприменима. В связи с этим следует рассмотреть возможность использования стратегий, предлагаемых в трехсторонних гармонизированных руководствах ICH «Качество биотехнологических/биологических лекарственных средств. Оценка вирусной безопасности лекарственных средств, получаемых биотехнологическим путем из линий клеток людей или животных» и «Качество биотехнологических/биологических лекарственных средств. Получение и описание характеристик клеточных субстратов, используемых для производства биотехнологических/биологических лекарственных средств».

2.1.5 Количество

Количество, измеряемое обычно как содержание белка, является критически важной характеристикой биотехнологических и биологических лекарственных средств. Его необходимо определять с помощью соответствующих методов количественного определения, обычно физико-химических. В некоторых случаях можно продемонстрировать, что полученные показатели количества могут быть прямо пропорциональны количествам, вычисленным с помощью количественного определения биологическим методом. При наличии такой корреляции во время производственных процессов, например, розлива, измерение количества может быть более целесообразным, чем измерение биологической активности.

2.2 Аспекты анализа, на которые следует обращать внимание

2.2.1 Стандартные образцы и материалы сравнения

Маловероятно, что существуют международные или государственные стандартные образцы для лекарственного применения новых молекулярных субстанций. На момент подачи регистрационных документов производитель должен установить и соответствующим образом охарактеризовать собственные материалы сравнения, подготовленные из партий, показательных для производства, и клинических материалов. Собственные рабочие материалы сравнения, используемые при тестировании производственных партий, должны быть откалиброваны по первичным материалам сравнения. Если международные или государственные стандартные образцы существуют, материалы сравнения должны быть откалиброваны по ним. В целом, желательно использовать одни и те же материалы сравнения для биологических и физико-химических испытаний, но в некоторых случаях могут быть необходимы отдельные материалы сравнения. Также отдельные материалы сравнения могут потребоваться для родственных субстанций, родственных примесей и технологических примесей. Когда это целесообразно, в подаваемые документы можно включить описание производства и/или очистки материалов сравнения. Также должны быть представлены документы по описанию характеристик, условиям хранения и составу, подтверждающие стабильность материала(-ов) сравнения.

2.2.2 Валидация методик анализа

К моменту подачи заявки в регуляторные органы заявитель должен провести валидацию методик анализа, используемых в спецификации, в соответствии с гармонизированными трехсторонними руководствами ICH «Валидация методик анализа: определения и терминология» и «Валидация методик анализа: методология», кроме случаев, когда для анализа биотехнологических и биологических лекарственных средств использовались уникальные испытания.

2.3 Контроль процесса производства

2.3.1 Аспекты, которые следует учесть в связи с контролем процесса производства

Адекватный дизайн процесса производства и знание его возможностей являются частью стратегии развития контролируемого и воспроизводимого производства, выпускающего лекарственные субстанции или препараты, которые соответствуют спецификациям. При этом предельные значения обосновываются важнейшей информацией, приобретенной за период от ранней стадии разработки процесса до производства промышленного масштаба.

Если в соответствующих исследованиях доказано, что определенные примеси эффективно контролируются или удаляются до приемлемого уровня, то в испытаниях лекарственных субстанций или препаратов на эти примеси может не быть необходимости, а также может быть не обязательно включать их в спецификации. В соответствии с региональными правилами, может предполагаться, что результаты таких испытаний будут подтверждаться при производстве в промышленном масштабе. Следует признать, что на момент подачи документов может быть доступно только ограниченное количество данных. Поэтому данная концепция, в некоторых случаях, в соответствии с региональными правилами, может быть применена после регистрации.

2.3.2 Внутрипроизводственные критерии приемлемости и пределы, при выходе за которые необходимо вмешательство в процесс

Внутрипроизводственные испытания проводятся во время принятия важнейших решений и на других этапах, на которых получаемые данные служат для подтверждения неизменности процесса производства лекарственных субстанций или препаратов. Результаты таких испытаний могут быть записаны как пределы, при выходе за которые необходимо вмешательство в процесс производства, или могут включаться в отчеты как критерии приемлемости. Проведение таких испытаний может устранить необходимость тестирования лекарственных субстанций или препаратов (раздел 2.3.1). Внутрипроизводственные испытания на занесенные агенты в конце культивирования клеток являются примером тестирования, для которого должны быть установлены критерии приемлемости.

Также важным является использование производителем внутренних предельных значений для вмешательства, чтобы оценить неизменность характеристик процесса на менее критичных этапах. Данные, полученные во время разработки и валидации, должны обеспечить основу для предварительных пределов для вмешательства, необходимых для данного производственного процесса. Эти пределы, за которые отвечает производитель, могут использоваться для начала расследования или дальнейших действий. По мере накопления опыта производства и получения данных после регистрации такие пределы должны корректироваться.

2.3.3 Спецификации для сырья и вспомогательных веществ

Качество сырья, используемого для производства лекарственной субстанции (или лекарственного препарата) должно соответствовать стандартам, отвечающим их назначению. Биологическое сырье или реактивы могут требовать тщательной оценки, чтобы установить наличие или отсутствие вредных эндогенных или занесенных веществ. Методики, в которых используется аффинная хроматография (например, использование моноклональных антител), должны сопровождаться соответствующими измерениями, чтобы подтвердить, что технологические примеси или потенциальные контаминанты, связанные с производством и использованием лекарственного средства, не влияют на качество и безопасность лекарственных субстанций или препаратов. Должна быть доступна соответствующая информация, касающаяся используемых антител.

Качество вспомогательных веществ, используемых в составе лекарственного препарата (в некоторых случаях лекарственной субстанции), а также систем упаковки и укупорки должно соответствовать стандартам фармакопеи, если таковые есть и подходят для применения. В противном случае, для нефармакопейных вспомогательных веществ, должны существовать соответствующие критерии приемлемости.

2.4 Фармакопейные спецификации

Фармакопеи содержат важные требования, относящиеся к определенным методикам анализа, и критерии приемлемости, являющиеся, в соответствующих случаях, частью оценки лекарственной субстанции или лекарственного препарата. Монографии с требованиями, применяемые к биотехнологическим или биологическим лекарственным средствам, обычно включают, помимо прочего, испытания на стерильность, эндотоксины, микробиологическую чистоту, объем содержимого упаковки, однородность единиц дозирования и механические включения. Не умаляя значимости использования фармакопейных методов и критериев приемлемости, следует отметить, что ценность данного руководства связана со степенью гармонизации методик анализа в фармакопеях. Фармакопеи принимают обязательство разработать идентичные или методологически эквивалентные методики испытаний и критерии приемлемости.

2.5 Предельные значения определенных характеристик на момент выпуска и в течение срока хранения

При наличии обоснования может применяться концепция предельных значений на момент выпуска и в течение срока хранения. Эта концепция относится к установлению предельных значений, которые на момент выпуска строже, чем для всего срока хранения лекарственных субстанций или препаратов. В качестве примера характеристик, к которым применим подход с установлением предельных значений на момент выпуска и в течение срока хранения, можно привести специфическую активность и продукты разложения. В некоторых регионах предел на момент выпуска может служить только для внутреннего использования, но не для срока хранения, предлагаемого регуляторным органам.

2.6 Статистические концепции

При необходимости следует проводить соответствующий статистический анализ количественных данных. Необходимо полностью описывать методы анализа, включая обоснования и пояснения. Эти описания должны быть достаточно ясными для проведения независимого расчета представленного результата.

3. ОБОСНОВАНИЕ СПЕЦИФИКАЦИИ

Установление спецификаций для лекарственных субстанций и препаратов является частью общей стратегии контроля, которая включает контроль сырья и вспомогательных веществ, внутрипроизводственные испытания, оценку или валидацию процесса производства, соблюдение GMP, тестирование стабильности и проверка партий на однородность характеристик. Собранные воедино, эти элементы гарантируют, что будет поддерживаться соответствующее качество лекарственного средства. В связи с тем, что спецификации выбираются для подтверждения качества продукции, а не для описания ее характеристик, производитель должен предоставить обоснования и пояснения для включения и/или исключения испытаний для определенных показателей качества. При представлении научно обоснованных спецификаций во внимание должны быть приняты следующие пункты:

Спецификации должны быть основаны на данных, полученных для партий, использовавшихся для демонстрации неизменности результатов производства. Связь спецификаций с процессом производства важна, особенно для родственных субстанций и примесей и технологических примесей. Изменения процесса производства и появление продуктов разложения во время хранения могут привести к неоднородности материала, характер которой отличается от характера, наблюдавшегося во время доклинической и клинической разработки. Необходимо изучать значение этих изменений.

При составлении спецификаций необходимо учитывать разложение лекарственных веществ и препаратов во время хранения. В силу комплексности биологических и биотехнологических лекарственных средств единого анализа для подтверждения стабильности или параметра, отражающего характеристики стабильности, не существует. Следовательно, производитель должен предложить профиль, указывающий на стабильность. Такой профиль в дальнейшем даст гарантию, что изменения качества лекарственного средства будут выявлены. Выбор испытаний для проведения будет зависеть от лекарственного средства. Производителю рекомендуется обращаться к гармонизированному трехстороннему руководству ICH «Испытания стабильности биотехнологических/биологических лекарственных средств».

Спецификации должны основываться на данных, полученных для партий, использовавшихся в доклинических и клинических исследованиях. Качество материала, изготовленного в промышленном масштабе, должно быть показательно для партий, использовавшихся в доклинических и клинических исследованиях.

Критические показатели качества могут включать, например, специфическую активность, происхождение и количество родственных субстанций, родственных и технологических примесей. Такие показатели можно оценить с помощью множества аналитических методик, которые дадут различные результаты. Во время разработки лекарственного средства аналитическая технология зачастую развивается параллельно с лекарственным средством. В связи с этим важно подтвердить, что данные, полученные во время разработки, коррелируют с данными, полученными на момент подачи заявки на регистрацию.

4. СПЕЦИФИКАЦИИ

Выбор испытаний для включения в спецификации зависит от лекарственного средства. Необходимо описать обоснование для установления адекватного диапазона критериев приемлемости. Эти критерии должны быть установлены и обоснованы с помощью данных для партий, использовавшихся в доклинических и/или клинических исследованиях и для демонстрации неизменности результатов производства, а также с помощью данных исследований стабильности и актуальных данных, полученных в ходе разработки.

В некоторых случаях лучше проводить испытания на этапе производства, а не на уровне лекарственной субстанции или лекарственного препарата. В таком случае результаты должны рассматриваться как внутрипроизводственные критерии приемлемости и включаться в спецификацию для лекарственных субстанций и препаратов в соответствии с требованиями региональных регуляторных органов.

4.1 Спецификации для лекарственных субстанций

В целом, для всех лекарственных субстанций применимы следующие испытания и критерии приемлемости (методики анализа описаны в разделе 2.2.2). Там, где это уместно, необходимо выполнять фармакопейные испытания (например, выявление эндотоксинов). Для определенных лекарственных субстанций могут потребоваться также дополнительные критерии приемлемости.

4.1.1 Внешний вид и описание

Необходимо представить отчет о качествах, описывающий физическое состояние (например, твердое, жидкое) и цвет лекарственной субстанции.

4.1.2 Подлинность

Испытания на подлинность должны быть высокоспецифичными, основанными на уникальных аспектах молекулярной структуры и/или других специфических свойствах. Для установления подлинности может потребоваться более одного анализа (физико-химического, биологического и/или иммунохимического). Испытания на подлинность могут быть качественными по своей природе. Некоторые методы, которые обычно используют для описания характеристик лекарственного средства, как это описано в разделе 2.1 и в приложении 6.1, могут применяться и/или модифицироваться в соответствии с целью установления подлинности.

4.1.3 Чистота и примеси

Полностью определить чистоту биотехнологических и биологических лекарственных средств трудно, а результат зависит от метода исследования (раздел 2.1.4). Поэтому чистоту лекарственной субстанции оценивают с помощью комбинации методов. Выбор и оптимизация методик анализа должны быть направлены на отделение целевого лекарственного средства от родственных субстанций и от примесей.

Примеси, обнаруживаемые в лекарственных средствах, классифицируются на технологические и родственные:

Выбор и оптимизация методик анализа в отношении примесей должны быть направлены на отделение целевого лекарственного средства и родственных субстанций от примесей. Там, где это уместно, должны быть установлены индивидуальные и/или коллективные критерии приемлемости в отношении примесей. При определенных условиях для отдельных примесей критерии приемлемости могут не требоваться (раздел 2.3).

4.1.4 Специфическая активность

Частью спецификаций для биотехнологических или биологических лекарственных субстанций и/или препаратов должны быть соответствующие валидированные методы количественного определения специфической активности (раздел 2.1.2). Когда проводится количественное определение специфической активности лекарственного препарата (раздел 4.2.4), на стадии лекарственной субстанции может быть достаточно альтернативных методов (физико-химических и/или биологических). В некоторых случаях дополнительную полезную информацию может дать измерение удельной активности.

4.1.5 Количество

Количество лекарственной субстанции, обычно на основании содержания (массы) белка, необходимо определять с помощью соответствующих испытаний. Определение количества может не зависеть от стандартных образцов или материалов сравнения. В случаях, когда производство основывается на специфической активности, альтернативное определение количества может не потребоваться.

4.2 Спецификации для лекарственных препаратов

В целом, для всех лекарственных препаратов применимы следующие испытания и критерии приемлемости. Каждый из разделов (4.2.1 4.2.5) перекликается с соответствующим разделом (4.1.1 – 4.1.5) для лекарственных субстанций. Фармакопейные требования применяются к соответствующим лекарственным формам. К типичным фармакопейным испытаниям относятся, помимо прочего, исследования на стерильность, эндотоксины, микробиологическую чистоту, объем содержимого упаковки, посторонние включения, однородность единиц дозирования и содержание влаги в лиофилизированных лекарственных препаратах. Если уместно, испытание на однородность единиц дозирования может проводиться в виде внутрипроизводственного контроля с соответствующим набором критериев приемлемости.

4.2.1 Внешний вид и описание

Необходимо представить отчет, описывающий качества: физическое состояние (например, твердое, жидкое), цвет и прозрачность лекарственного препарата.

4.2.2 Подлинность

Испытания на подлинность лекарственного препарата должны быть высокоспецифичными, основанными на уникальных аспектах молекулярной структуры и других специфических свойствах. Испытание на подлинность может быть качественным по своей природе. Хотя следует признать, что в большинстве случаев достаточно одного испытания, для установления подлинности некоторых препаратов может потребоваться более одного анализа (физико-химического, биологического и/или иммунохимического). Некоторые методы, которые обычно используют для описания характеристик лекарственных средств, как это было описано в разделе 2.1 и в приложении 6.1, могут применяться и/или модифицироваться в соответствии с целью установления подлинности.

4.2.3 Частота и примеси

Во время производства или хранения лекарственного препарата могут образовываться примеси, или может увеличиваться их количество. Эти примеси могут быть либо такими же, как и в лекарственных субстанциях, либо технологическими примесями, либо продуктами разложения, образующимися исключительно в препарате во время изготовления лекарственной формы или при хранении. Если примеси качественно и количественно (то есть относительные количества и/или концентрации) соответствуют примесям в лекарственной субстанции, проведение испытаний не обязательно. Если известно, что примеси занесены или сформировались во время производства и/или хранения лекарственного препарата, необходимо определять количество этих примесей и установить критерии приемлемости.

Необходимо разрабатывать и обосновывать критерии приемлемости и методики анализа с учетом предыдущего опыта работы с лекарственным препаратом, чтобы измерить изменения в лекарственных субстанциях во время производства и/или хранения лекарственного препарата.

Выбор и оптимизация методик анализа должны быть направлены на отделение целевого лекарственного средства и родственных субстанций от примесей (включая продукты разложения) и от вспомогательных веществ.

4.2.4 Специфическая активность

Частью спецификаций для биотехнологических или биологических лекарственных субстанций и/или препаратов должны быть соответствующие валидированные методы количественного определения специфической активности (раздел 2.1.2). Когда проводится соответствующее количественное определение специфической активности лекарственной субстанции, на стадии лекарственного препарата может быть достаточно альтернативных методов (физико-химических и/или биологических). Однако требуется обосновать такой выбор.

4.2.5 Количество

Количество лекарственной субстанции в лекарственном препарате, обычно на основании содержания (массы) белка, необходимо определять с помощью соответствующих испытаний. В случаях, когда производство основывается на специфической активности, в альтернативном определении количества может не быть необходимости.

4.2.6 Общие испытания

Физическое описание и измерение других критериев качества часто важны для оценки функций лекарственного препарата. К примерам таких испытаний относятся исследование рН и осмолярности.

4.2.7 Дополнительные испытания уникальных лекарственных форм

Следует признать, что определенные уникальные лекарственные формы могут потребовать дополнительных испытаний, отличающихся от описанных выше.

5. ГЛОССАРИЙ

Критерии приемлемости

Числовые пределы, диапазоны и другие подходящие для признания приемлемости результатов анализа меры, которым должны соответствовать лекарственные субстанции, препараты или материалы на разных этапах производства.

Пределы, при выходе за которые необходимо вмешательство в производственный процесс

Внутренний (собственный) параметр, используемый для оценки неизменности результатов производства на менее критичных этапах.

Биологическая активность

Специфическая способность или возможность лекарственного средства производить определенный биологический эффект. Специфическая активность – это количественная мера биологической активности.

Контаминанты

Любые занесенные материалы (например, химические, биологические или микробные), не являющиеся частью процесса производства лекарственной субстанции или препарата.

Продукты разложения

Молекулярные варианты, возникшие в результате изменений в целевом лекарственном средстве, или родственные субстанции, появившиеся с течением времени и/или под воздействием света, рН, температуры, воды, или в результате реакции со вспомогательным веществом или первичной системой упаковки/укупорки. Такие изменения (например, дезамидирование, окисление, агрегация, протеолиз) могут возникать в результате производства и/или хранения. Продукты разложения могут быть родственными субстанциями или родственными примесями.

Целевое лекарственное средство

(1) Белок, имеющий ожидаемую структуру, или (2) белок, ожидаемый как результат данной последовательности ДНК и посттрансляционной модификации (включая гликоформы), а также в результате преднамеренной нисходящей модификации для получения активной биологической молекулы.

Лекарственный препарат (лекарственная форма, готовый лекарственный препарат)

Тип фармацевтического лекарственного средства, который содержит лекарственную субстанцию со вспомогательными веществами.

Лекарственная субстанция (материал в нерасфасованном виде)

Материал, из которого вместе со вспомогательным веществом производят лекарственный препарат. Он может состоять из целевого лекарственного средства, родственных субстанций, а также родственных или технологических примесей. Также он может содержать вспомогательные вещества, включая другие компоненты, например, буферы.

Вспомогательное вещество

Ингредиент, специально добавляемый к лекарственной субстанции, который в применяемом количестве не должен иметь фармакологических свойств.

Примесь

Любой компонент в лекарственной субстанции или лекарственном препарате, не являющийся целевым лекарственным средством, родственной субстанцией или вспомогательным веществом, в том числе буфером. Примеси могут быть либо технологическими, либо родственными.

Собственные первичные материалы сравнения

Соответствующим образом охарактеризованные материалы, подготовленные производителем из показательной партии (или нескольких показательных партий) лекарственного средства, для биологического количественного определения и физико-химических испытаний последующих партий. По ним калибруются собственные рабочие материалы сравнения.

Собственные рабочие материалы сравнения

Материалы, подготовленные так же, как и первичные материалы сравнения, и представленные исключительно для оценки и контроля последующих партий лекарственного средства по отдельным представляющим интерес критериям. Они всегда калибруются по первичным материалам сравнения.

Специфическая активность

Мера биологической активности, использующая подходящий количественный биологический анализ (так называемое биологическое количественное определение или биопробу) и основанная на характеристике лекарственного средства, связанной с соответствующими биологическими свойствами.

Технологические примеси

Примеси, которые возникают в результате производственного процесса. Они могут появляться из клеточных субстратов (например, белки клетки-хозяина, ДНК клетки-хозяина) и клеточных культур (например, индукторы, антибиотики, компоненты сред) или в результате последующей обработки (например, реактивы для обработки или вещества, выщелачиваемые из колонки).

Родственные примеси

Молекулярные варианты целевого лекарственного средства (например, предшественники, определенные продукты разложения, возникающие во время производства и/или хранения), которые не имеют свойств, сравнимых со свойствами целевого препарата в отношении активности, эффективности и безопасности.

Родственные субстанции

Молекулярные варианты целевого лекарственного средства, образующиеся во время производства и/или хранения, которые активны, не оказывают отрицательного влияния на безопасность и эффективность лекарственного препарата. Эти варианты обладают свойствами, сравнимыми с целевым лекарственным средством, и не считаются примесями.

Стандартный образец

Этот термин относится к международным или государственным стандартным образцам.

Спецификация

Спецификация это список испытаний, ссылок на методики анализа и соответствующие критерии приемлемости, которые представляют собой числовые пределы, диапазоны или другие критерии для описанных испытаний. Спецификация устанавливает набор критериев, которым должны соответствовать лекарственные субстанции, препараты или материалы на других стадиях производства, чтобы считаться приемлемыми для применения по назначению. «Соответствие спецификации» означает, что лекарственная субстанция и лекарственный препарат соответствует критериям преемственности при испытаниях с помощью перечисленных методик анализа. Спецификации – важнейшие стандарты качества, которые предлагаются или обосновываются производителем и одобряются регуляторными органами как условие регистрации лекарственного средства.

6. ПРИЛОЖЕНИЯ

6.1 Приложение по описанию физико-химических характеристик

В этом приложении даются примеры технических подходов, которые могут использоваться для описания характеристик и подтверждения структуры, а также оценки физико-химических свойств целевого лекарственного средства лекарственной субстанции и/или лекарственного препарата. То, какой будет выбран технический подход, будет меняться от лекарственного средства к лекарственному средству, и во многих случаях уместными будут альтернативные подходы, отличающиеся от описанных в данном приложении. В соответствующих случаях следует выбирать постоянно появляющиеся новые технологии анализа и модификации существующих технологий.

6.1.1 Описание характеристик и подтверждение структуры

Следует определять последовательность аминокислот целевого лекарственного средства насколько это возможно с помощью методов, описанных в пунктах от b до е, а затем сравнивать с последовательностью аминокислот целевого лекарственного средства, выведенной по генной цепочке.

Общий аминокислотный состав определяется с помощью различных гидролитических и аналитических методик и сравнивается с вычисленным по генетической последовательности аминокислотным составом целевого лекарственного средства или природного аналога, если это необходимо. Во многих случаях анализ аминокислотного состава дает полезную информацию о структуре пептидов и малых белков, но такие данные в целом менее информативны для больших белков. Данные количественного анализа аминокислот во многих случаях могут использоваться для определения содержания белка.

Анализ концевых аминокислот выполняется с целью определения природы и однородности N- и C-концевых аминокислот. Если целевое лекарственное средство неоднородно в отношении концевых аминокислот, необходимо с помощью соответствующих методик анализа определить относительное количество вариантных форм. Необходимо сравнить последовательность этих концевых аминокислот с последовательностью концевых аминокислот, выведенной из генной последовательности целевого лекарственного средства.

Выборочная фрагментация лекарственного средства на отдельные пептиды выполняется с помощью соотвествующих ферментов или химических веществ, а полученные пептидные фрагменты анализируют с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии или других подходящих методик анализа. Необходимо идентифицировать пептидные фрагменты, насколько это возможно, с помощью таких методов, как анализ состава аминокислот, N-концевое секвенирование или масс-спектрометрия. Пептидное картирование лекарственных субстанций или препаратов с помощью прошедшей надлежащую валидацию методики является методом, часто используемым для подтверждения структуры целевого лекарственного средства с целью выпуска партии.

Если, судя по генным последовательностям целевого лекарственного средства, ожидается наличие цистеиновых остатков, необходимо, насколько это возможно, определить количество и положение любых свободных сульфгидрильных групп и/или дисульфидных мостиков. С этой целью могут использоваться пептидное картирование (в восстанавливающих и в невосстанавливающих условиях), масс-спектрометрия или другие подходящие техники.

Для гликопротеинов необходимо определить содержание углеводов (нейтральные сахара, аминосахара и сиаловые кислоты). Также необходимо проанализировать, насколько это возможно, структуру углеводных цепей, характер олигосахаридов (профиль ветвления) и места гликозилирования полипептидных цепей.

6.1.2 Физико-химические свойства

Молекулярный вес (или размер) определяют с помощью эксклюзионной хроматографии, электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (в восстанавливающих и в невосстанавливающих условиях), масс-спектрометрии и других подходящих техник.

Определяется с помощью изоэлектрического фокусирования или других подходящих техник.

Во многих случаях будет желательно определить коэффициент экстинкции (или молярный коэффициент поглощения) целевого лекарственного средства при определенной длине волны УФ/видимого света (например, 280 нм). Коэффициент экстинкции определяют с помощью УФ-спектрофотометрии раствора лекарственного средства, имеющего известное содержание белка (определенного путем анализа состава аминокислот или содержания азота и т. д.). Если содержание белка определяется по поглощению УФ излучения, необходимо использовать коэффициент экстинкции для конкретного лекарственного средства.

Определить характер электрофореза, а также получить данные по подлинности, однородности и частоте можно с помощью электрофореза в полиакриламидном геле, изоэлектрического фокусирования, электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия, вестерн-блоттинга, капиллярного электрофореза и других подходящих методик.

Определить характер хроматографирования, а также получить данные по идентичности, однородности и частоте можно с помощью эксклюзионной хроматографии, жидкостной хроматографии с обращенной фазой, ионообменной жидкостной хроматографии, аффинной хроматографии и других подходящих методик.

В соответствующих случаях определяют поглощение УФ и видимого спектра. Структуру более высокого порядка в лекарственных средствах исследуют с помощью таких методик, как круговой дихроизм, ядерный магнитный резонанс (ЯМР), или других подходящих в конкретной ситуации техник.

6.2 Приложение по примесям

В этом приложении перечислены потенциальные примеси, их источники и примеры подходящих аналитических подходов к их выявлению. Специфические примеси и используемые технические подходы (как в случае описания физико-химических характеристик) будут меняться от лекарственного средства к лекарственному средству, а во многих случаях будут уместны альтернативные методы, отличающиеся от перечисленных в данном приложении. Также постоянно идет развитие новых и модифицирование существующих аналитических технологий; они должны использоваться там, где это нужно.

6.2.1 Технологические примеси и контаминанты

Эти примеси возникают во время процесса производства (раздел 2.1.4). Их классифицируют на три основные категории: возникающие из субстратов клеток, возникаюшие из культур клеток и возникающие при последующей обработке.

В соответствии с трехсторонним гармонизированным руководством ICH «Оценка вирусной безопасности биотехнологических лекарственных средств, полученных из клеток людей или животных», необходимо показать способность производственного процесса удалять или инактивировать намеренно добавленные, эндогенные или занесенные извне вирусы.

6.2.2 Родственные примеси, включая продукты разложения лекарственного средства

Ниже представлены наиболее часто встречаемые молекулярные варианты целевого лекарственного средства и перечислены подходящие технологии для их оценки. При выделении таких вариантов и описания их характеристик могут потребоваться значительные усилия для определения типа модификации. Продукты разложения, возникающие в значительном количестве во время производства и/или хранения, необходимо анализировать и отслеживать по соответствующим образом установленным критериям приемлемости.